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延伸拓展
产品介绍:An基酸检测方法:一、双指示剂甲醛滴定法An基酸含有酸性的COOH基,也含有碱性的一NH2,它们相互作用使An基酸成为中性的钠盐,不能直接用碱液滴定它的梭基。当加入甲醛时,-NH2与甲醛结合,其碱性消失,使COOH基显示出酸性,可用氢氧化Na标准溶液滴定。用此法滴定的结果表示a一An基酸态氮的含量,其精确度仅达An基酸理论含量的90%。如果样品中只含有某一种已知的An基酸,从甲醛滴定的结果可算出该An基酸的含量。如果样品是多种An基酸的混合物(如蛋白水解液),则滴定结果不能作为An基酸的定量依据,但一般常用此法测定蛋白质水解程度,当水解完成后,滴定值不再增加。但应注意,脯氨酸与甲醛作用产生不稳定的化合物,使结果偏低;酪氨酸含有酚羟Ji,滴定时要消耗一些碱,使结果偏高;溶液中若有铵存在也可与甲醛反应,使结果偏高。样品中An基酸含量根据下列公式计算:X=[(V2一V1)×C×0.014]/V×100式中:X—An基酸含量,g/100mL;V1—中性红作指示剂时消耗氢氧化Na标准液的体积,mL;V2—百里酚酞作指示剂时消耗氢氧化Na标准液的体积,mL;C—氢氧化Na标准液的浓度,mol/L;V—样品液取用量,mL;0.014—氮的毫摩尔质量,g/mmol。说明及注意事项如下。(1)此法适用于测定食品中的游离An基酸。(2)固体样品应先进行粉碎,准确称样后用水萃取,然后测定萃取液;液体试样如酱油、饮料等可直接吸取试样进行测定。萃取可在50℃水浴中进行0.5h即可。(3)若样品颜色较深,可加适量活性炭脱色后再测定,或用电位滴定法进行测定。(4)与本法类似的还有单指示剂(百里酚酞)甲醛滴定法,此法用标准碱完全中和COOH基时的pH值为8.5一9.5,但分析结果稍偏低,即双指示剂法的结果更准确。二、电位滴定法本法根据酸度计指示pH值控制滴定终点,适合有色样液的检测。样品中An基酸含量根据下列公式计算:X=[(V1一V2)×C×0.014]/(5×V)×100式中:X—An基酸含量,g/100mL;V1—测定用样品加入甲醛稀释后消耗氢氧化Na标准液,mL;V2—试剂空白试验加如甲醛后消耗氢氧化Na标准溶液的体积,mL;C—氢氧化Na标准液的浓度,moVL;V—样品稀释液取用量,mL;0.014—氮的毫摩尔质量,g/mmol。说明及注意事项如下。(1)本法准确快速,可用于各类样品游离An基酸含量测定。(2)对于混浊和色深样液可不经处理而直接测定。
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